当破伤风毒素通过破伤风梭菌发酵制成时，传统的铁来源是一种称为还原铁粉的不溶性制剂，该材料通过形成FeO（2）（锈）从系统中除去氧。

  

  当接种在缺乏动物和乳制品且含有葡萄糖，大豆蛋白胨和无机盐的新开发的培养基中时，生长和毒素产生很差而没有减少的铁粉。发现用于毒素生产的还原铁粉的浓度为0.5g/l。浓度越高，生长进一步增加，但毒素产量下降。

  

  无机铁源未能取代还原铁粉用于生长或毒素形成。最接近的铁源是硫酸亚铁铵。有机铁来源柠檬酸铁和葡萄糖酸亚铁比无机化合物更有活性，但不能代替还原铁粉。不溶性铁源，例如铁丝，铁箔和活性炭，令人惊讶地具有活性。

  

  活性炭与可溶性铁源如硫酸亚铁，柠檬酸铁和葡萄糖酸亚铁的组合显示出活性增加，并且葡萄糖酸亚铁组合几乎取代了还原铁粉。因此，似乎传统的铁源，还原铁粉，在支持破伤风毒素形成中起双重作用，即释放可溶性铁源并提供不溶性表面。